新葡萄京娱乐场8455菌落总数的计数和报告

发布时间:17-02-23 17:47分类:技术文章
标签:菌落计数器,菌落计数器的操作流程与方法
菌落计数器是一种数字显示式自动细菌检验仪器。但是随着科技的进步,菌落计数器也由普通的衍变成了全自动菌落计数器。主要体现在配置越来越高,功能越来越全。计数的速度越来越快,准确性也越来越高。菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每克(或每ml)原始样品中所含细菌菌落总数。菌落计数器的是怎样操作的?基本操作一般包括:样品的稀释–倾注平皿–培养48小时–计数报告。国内外菌落总数测定方法基本一致,从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同,只是在某些具体要求方面稍有差别,如有的*在样品稀释和倾注培养进,对吸管内液体的流速,稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。1.操作方法:培养到时间后,计数每个平板上的菌落数。可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落总数后,求出同稀释度的各平板平均菌落数,计算处原始样品中每克(或每ml)中的菌落数,进行报告。2.到达规定培养时间,应立即计数。如果不能立即计数,应将平板放置于0-4℃,但不得超过24h。3.计数时应选取菌落数在30~300之间的平板(SN标准要求为25~250个菌落),若有二个稀释度均在30~300之间时,按*标准方法要求应以二者比值决定,比值小于或等于2取平均数,比值大于2则其较小数字(有的规定不考虑其比值大小,均以平均数报告)。4.若所有稀释度均不在计数区间。如均大于300,则取*高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如均小于30,则以*低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之。如菌落数有的大于300,有的又小于30,但均不在30~300之间,则应以*接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如所有稀释度均无菌落生长,则应按小于1乘以*低稀释倍数报告之。有的规定对上述几种情况计算出的菌落数按估算值报告。5.不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比(同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近),即稀释倍数愈高菌落数愈少,稀释倍数愈低菌落数愈多。如出现逆反现象,则应视为检验中的差错(有的食品有时可能出现逆反现象,如酸性饮料等),不应作为检样计数报告的依据。6.当平板上有链状菌落生长时,如呈链状生长的菌落之间无任何明显界限,则应作为一个菌落计,如存在有几条不同来源的链,则每条链均应按一个菌落计算,不要把链上生长的每一个菌落分开计数。如有片状菌落生长,该平板一般不宜采用,如片状菌落不到平板一半,而另一半又分布均匀,则可以半个平板的菌落数乘2代表全平板的菌落数。7.当计数平板内的菌落数过多(即所有稀释度均大于300时),但分布很均匀,可取平板的一半或1/4计数。再乘以相应稀释倍数作为该平板的菌落数。8.菌落数的报告,按*标准方法规定菌落数在1~100时,按实有数字报告,如大于100时,则报告前面两位有效数字,第三位数按四舍五入计算。固体检样以克(g)为单位报告,液体检样以毫升(ml)为单位报告,表面涂擦则以平方厘米(cm2)报告。欲了解更多仪器仪表产品信息,请登录“爱仪器仪表网”。

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  • 发布人:总管理员 发布时间:2011-04-26 浏览次数:1262次
  • 1.计数时应选取菌落数在30~300之间的平板,有的为25~250(取两个平板的平均值),若有二个稀释度均在30~300之间时,按国家标准方法要求应以二者比值决定,比值小于或等于2取平均数,比值大于2则取其较小数字(有的规定不考虑其比值大小,均以平均数报告)。

    2.若所有稀释度均不在30~300之间。如均大于300,则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如均小于30,则以最低稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如菌落数有的大于300,有的又小于30,但均不在30~300之间,则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如所有稀释度均无菌落生长,则应按小于1乘以最低稀释倍数报告之。有的规定对上述几种情况计算出的菌落数按估算值报告。

    3.不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比(同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近),即稀释倍数愈高菌落数愈少,稀释倍数愈低菌落数愈多。如出现逆反现象,则应视为检验中的差错(有的食品有时可能出现逆反现象,如酸性饮料等),不应作为检样计数报告的依据。

    4.当平板上有链状或片状菌落生长时,如呈链状生长的菌落之间又无何明显界限,则应作为一个菌落计,如存在有几条不同来源的链,则每条链均应按一个菌落计算,不要把链上生长的每一个菌落分开计数。如有片状菌落生长,该平板一般不宜采用,如片状菌落不到平板的一半,而另一半又分布均匀,则可以半个平板的菌落数乘2代表全平板的菌落数。

    5.当计数平板内的菌落数过多(即所有稀释度均大于300时),但分布很均匀,可取平板的一半或1/4计数。再乘以相应稀释倍数作为该平板的菌落数。

    6.菌落数的报告,按国家标准方法规定菌落数在1~100时,按实有数字报告;如大于100时,则报告前面两位有效数字,第三位数按四舍五入计算。固体检样以克为单位报告,液体检样以毫升为单位报告,表面涂擦则以平方厘米报告。

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1 原理

微生物是影响生鲜乳质量安全的重要因素,生鲜乳的微生物质量控制指标为菌落总数。菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等),所得1毫升检样中形成的菌落的总数。

2 试剂和材料

平板计数琼脂培养基。胰蛋白胨5克,酵母浸膏2.5克,葡萄糖1.0克,琼脂15.0克,蒸馏水1
000毫升。将上述成分加入蒸馏水中,煮沸溶解,调节pH值至7.0±0.2,然后将其分装于试管或锥形瓶内,121℃高压灭菌15分钟。

无菌生理盐水。称取8.5克氯化钠溶于1 000毫升蒸馏水中,12℃高压灭菌15分钟。

3 仪器设备

恒温培养箱(36±1℃),高压蒸汽灭菌器,冰箱
,恒温水浴锅(46±1℃)。天平感量,均质器,振荡器,无菌吸管1毫升、10毫升或微量移液器及吸头,无菌锥形瓶(容量250、500毫升)。无菌培养皿,放大镜或菌落计数器。

4 操作步骤

样品的稀释。以无菌吸管吸取25毫升样品,置于盛有225毫升生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10的样品匀液。无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1毫升,沿管壁缓慢注于盛有9毫升生理盐水的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振荡试管使其混合均匀,制成1:100的样品匀液。按上述操作程序,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用一次1毫升无菌吸管或吸头。根据对样品污染状况的估计,选择2~3个适宜稀释度的样品匀液,在进行10倍递增稀释时,每个稀释度分别吸取1毫升样品匀液加入两个无菌平皿内。同时分别取1毫升生理盐水加入两个无菌平皿作空白对照。及时将15~20毫升冷却至46℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。

培养。培养基凝固后,将平板翻转,置36±1℃培养48±2小时。如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖以薄层琼脂培养基,凝固后翻转平板,按上述条件进行培养。

菌落计数。可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(Colony-Forming
Units,CFU)表示。选取菌落数在30~300
CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30
CFU的平板记录具体菌落数,大于300
CFU多可不计数。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数。若片状菌落小于1/2平板,而另外1/2平板菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数。

5 结果与报告

菌落总数的计算。若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克中菌落总数结果。若所有稀释度的平板上菌落数均大于300
CFU,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板多不可计数,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。若所有稀释度的平板菌落数均小于30
CFU,则应按稀释度最低的平板菌落数乘以稀释倍数计算。若所有稀释度平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算。若所有稀释度的平板菌落数均不在30~300
CFU之间,其中一部分小于30 CFU或大于300 CFU时,则以最接近30 CFU或300
CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。

菌落总数的报告。菌落数小于100
CFU时,按“四舍五入”的原则修约,采用两位有效数字报告。大于或等于100
CFU时,第三位数字采用“0”代替位数,也可用10的指数形式来表示,按“四舍五入”的原则修约后,采用两位有效数字。若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落蔓延。若空白对照上有菌落生长,则此次检查结果无效。称重取样以CFU/克为单位,体积取样以CFU/克为单位报告。

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